实时定量PCR（qPCR）在科研中有哪些应用？

时间: 2025-05-16 15:28:38

实时荧光定量PCR（qPCR）在科研领域的应用主要包括以下方面：

1. ‌基因表达分析‌

功能研究‌：通过检测mRNA水平分析基因在不同组织、发育阶段或环境条件下的表达差异。

动态监测‌：实时追踪基因表达变化，如植物抗逆基因在干旱或盐胁迫下的响应。

2. ‌基因组学与转录组学‌

数据验证‌：用于验证RNA-seq或芯片数据的准确性。

拷贝数变异检测‌：定量分析基因拷贝数变异（CNV）或单核苷酸多态性（SNP）。

3. ‌病原体与微生物研究‌

病原体载量检测‌：定量病毒（如HIV、HBV）或细菌的核酸载量，评估感染程度。

微生物群落分析‌：通过16S rRNA基因扩增研究环境或肠道微生物组成。

4. ‌癌症与疾病机制研究‌

肿瘤标志物筛查‌：检测癌基因突变（如EGFR）、融合基因或甲基化水平。

遗传病诊断‌：分析地中海贫血等遗传病的基因突变频率。

5. ‌分子互作与调控网络‌

miRNA靶向验证‌：结合RT-qPCR验证miRNA与靶基因的调控关系。

6. ‌转基因与基因编辑‌

转基因生物检测‌：定量外源基因在转基因作物中的表达水平。

CRISPR编辑效率评估‌：检测基因编辑后的等位基因频率变化。

qPCR因其高灵敏度（可检测单拷贝基因）和动态范围宽（跨越7个数量级），成为分子生物学研究的核心工具。